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金胺“O”荧光染色法与萋 - 尼染色法在肺结核 细菌学检验中的应用效果比较论文

发布时间:2021-11-24 10:33:44 文章来源:SCI论文网 我要评论














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 【摘要】   目的:比较金胺“O”荧光染色法与萋 - 尼染色法在肺结核细菌学检验中的应用效果。  方法: 选取 144 例肺结核患者为 研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组各 72 例,两组均取痰液样本行肺结核细菌学检验,对照组采用萋 - 尼染色法,观察组 采用金胺“O”荧光染色法,比较两组结核分枝杆菌阳性检出率和检验时间。  结果: 观察组阳性检出率为 88.9%(64/72)  ,高于对照组的 55.6%(40/72),  差异有统计学意义( P<0.05);  观察组检验所需时间为(31.06±4.51)min,  短于对照组的(46.38±5.23)min,  差异有 统计学意义(t=18.823,  P=0.000)。  结论: 金胺“O”荧光染色法在肺结核细菌学检验中可提高结核分枝杆菌阳性检出率,缩短检验时间, 优于萋 - 尼染色法检验效果。

【关键词】  肺结核;结核分枝杆菌;金胺“O”荧光染色法;萋 - 尼染色法;细菌学检验;阳性检出率

结核分枝杆菌是结核病的病原菌,该病菌可侵 犯全身各组织器官,以肺部感染最多见,严重影响身体健康和生命安全 [1-2]。细菌学检验是临床诊断 肺结核患者的重要方式, 尤以抗酸染色法最为常见, 其检验的特异度较高 [3-4] 。本文比较金胺“O”荧 光染色法与萋 - 尼染色法在肺结核细菌学检验中的 效果。

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1  资料与方法


1.1   一般资料   选取 2017 年 1 月至 2020 年 12 月 本院收治的 144 例肺结核患者为研究对象。纳入标准:  符合肺结核诊断标准 [5];  病情稳定。排除标准: 合并心、肝、肾等器官功能障碍;合并凝血功能障 碍。患者对本研究内容了解并自愿签署知情同意书, 且本研究经本院伦理委员会审核通过。按照随机数 字表法分为对照组与观察组各 72 例。对照组:男 41 例,女 31 例;年龄 32~79 岁,平均(57.3±5.8)岁; 病程 1~8 年,  平均(3.2±0.6) 年。观察组:  男 44 例, 女 28 例; 年龄 30~78 岁, 平均(57.5±5.6)岁; 病程 1~9 年,  平均(3.4±0.5) 年。两组一般资料 比较,差异无统计学意义( P>0.05),有可比性。

 1.2   方法   所有患者留取痰液标本前均采用生理 盐水彻底漱口,从深处咳痰,采用无菌塑料标本盒 收集痰液标本。检测操作开始前在痰液标本中加入适量胰酶消化液,并给予一段时间的水浴,然后加 入适量氢氧化钠溶液,振荡混合处理。经过处理之 后的痰标本以 3000 r/min 转速,  离心半径 10 cm 离 心 10 min,将沉淀物均匀涂抹在玻片上,涂抹成约 10 mm ×20 mm 的椭圆形痰膜,每份标本涂片2张, 将涂好的痰片室温下干燥后于5  s 内进行酒精灯火 焰固定。

对照组采用萋 - 尼染色法实施细菌学检验。按 照《中国结核病防治规划痰涂片镜检标准化操作及 质量保证手册》[6]  中相关规定进行初染、脱色、复 染等操作。

观察组采用金胺“O”荧光染色法实施细菌学 检验。初染: 将固定处理后的玻片放置在染色架上, 滴加 0.1% 的金胺“O”染色液覆满玻片,放置 15 min;脱色:用自来水缓慢冲去初染液, 滴加 0.5% 的盐酸乙醇脱色 2 min,直至外观没有黄色为止; 复染:用自来水缓慢冲去脱色液,滴加 0.5% 的高 锰酸钾复染液覆满玻片,1  min 后用自来水缓慢冲 去复染液,将玻片沥干水分,晾干之后待检。

镜检:萋 - 尼染色涂片应用生物显微镜进行镜 检,以 100× 油镜进行观察,蓝色背景下结核分枝 杆菌呈现为红色杆状。金胺“O”荧光染色法应用 荧光显微镜进行镜检,以 20× 物镜计数,  40× 物 镜对结核分枝杆菌菌体形态进行观察,在暗色背景 下,结核分枝杆菌发出黄绿色荧光,菌体则呈现为 短棒状或杆状略弯曲。

1.3   观察指标    (1)比较两组结核分枝杆菌阳性 检出率。(2)比较两组检验所需时间。

1.4   统计学方法   采用 SPSS 22.0 统计学软件处理 数据,计量资料比较采用 t 检验,  计数资料比较采 用 χ2 检验,以 P<0.05 为差异有统计学意义。

2  结果

2.1   两组结核分枝杆菌阳性检出率比较   观察 组阳性检出率为 88.9%(64/72),  高于对照组的 55.6%(40/72),  差异有统计学意义( χ2=19.938, P=0.000)。

2.2    两组检验所需时间比较    观察组检验所 需 时 间 为(31.06±4.51)min,   短于对照组的 (46.38±5.23)min, 差异有统计学意义(t=18.823, P=0.000)。

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3  讨论

结核病细菌学检查是临床公认的诊断结核病的 重要依据 [7] 。金胺“O”荧光染色法和萋 - 尼染色 法的检测原理基本相同,都是利用结核分枝杆菌具 有的嗜石炭酸性,在染色剂当中加入一定量的石炭 酸,  使其成为一种媒染剂 [8]。萋 - 尼染色法是目前 临床上常用的一种细菌学检测方法,经过染色处理 之后的分枝杆菌呈现红色,而其他的细菌呈蓝色, 但该检测方法时间相对较长,  且阳性检出率较低, 只有当细菌的浓度达到较高水平(10 000 个 /mL) 的时候才能够被检测出 [9] 。金胺“O”荧光染色法 是通过适当的加热处理,使荧光染料渗入到结核分 枝杆菌菌体中,从而使结核分枝杆菌在暗背景下呈 黄绿色的荧光。本研究结果显示,观察组结核分枝 杆菌阳性检出率高于对照组;检验所需时间短于对 照组。

综上所述,金胺“O”荧光染色法在肺结核细 菌学检验中可提高结核分枝杆菌阳性检出率,缩短 检验时间,优于萋 - 尼染色法检验效果。

参考文献

[1]    易斌,  曾瑜,  李佳萌 . 胸水 ADA、IFN-γ 及 TB-DNA 的联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值 [J]. 标记免疫分析与临床, 2016,20(11):1341-1343.
[2]     陶峰,顾超,张齐 . 环介导等温扩增技术联合结核分枝杆菌快速培养在涂阴肺结核中的诊断价值 [J]. 中国现代医生, 2017,55(5):19-22.
[3]    张晓梅,张兴旺,叶华,等 . 结核特异性细胞免疫反应试验在结核病中的诊断价值 [J]. 国际检验医学杂志,  2016,  37 (11):1568-1570.
[4]    李红 . 诊断治疗结核病临床中应用结核抗体检测联合抗酸染色法结果分析 [J]. 饮食保健,2016,3(18):210-211.
[5]    张培元 . 肺结核诊断和治疗指南 [J]. 中华结核和呼吸杂志,2001,24(2):70-74.
[6]     中国疾病预防控制中心 . 中国结核病防治规划痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册 [M]. 北京:中国医科大学出版社, 2009:7-12.
[7]    王静,刘立宾,岳永宁,等 . RNA 恒温扩增实时检测技术与荧光定量 PCR 联合检测肺泡灌洗液对痰涂阴性肺结核的快 速诊断价值 [J]. 中华医院感染学杂志,2017,27(2):300- 304.
[8]    李海余,唐丽群,田祖建 . 金胺“0”荧光染色法对结核病细菌学检验的临床价值 [J]. 医学信息,2015,29(42):80-81.
[9]    毛小芳,  杨敏,  谢英,  等 . 金胺“O”荧光染色 LED 显微镜检测痰中抗酸杆菌的应用 [J]. 实验与检验医学, 2016, 34(1): 82-83.
 
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