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耐甲氧西林金葡菌检测方法比较论文(附论文PDF版下载)

发布时间:2018-09-28 11:00:55 文章来源:SCI论文网 我要评论














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摘  要:目的  比较不同的耐甲氧西林金葡菌检测方法。方法  在我院 2016 年 1 月至 2017 年 1 月的临床感染标本中分离出金葡菌菌株 120 株作为研究对象,分别采用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法及 PCR 法对120 株金葡菌菌株进行检测,并以 PCR 法的检测结果作为黄金标准,比较不同检测方法对耐甲氧西林金葡菌的检测效果。结果 120 株金葡菌菌株经 PCR 法检测发现耐甲氧西林金葡菌 71 株(59.17%),甲氧西林敏感金葡菌 49 株(40.83%)。苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率及 Youden 指数分别为 81.69%、77.56%、18.31%、22.45%、0.584;头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率及 Youden 指数分别为 92.96%、95.92%、7.04%、4.08%、0.817;比较示头孢西丁纸片扩散法对耐甲氧西林金葡菌的检测效果优于苯唑西林纸片扩散法(P< 0.05)。结论 P PCR 法是检测耐甲氧西林金葡菌的首选方法,此外头孢西丁纸片扩散法操作方便、实验要求低、结果较准确,也是一种较好的检测方法。

关键词: 耐甲氧西林金葡菌;苯唑西林纸片扩散法;头孢西丁纸片扩散法;PCR 法;检测

本文引用格式:吴强. 耐甲氧西林金葡菌检测方法比较 [J]. 世界最新医学信息文摘 ,2018,18(70):156+158.

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0引言

金葡菌即金黄色葡萄球菌,是一种高毒性细菌,临床感染率较高,其主要会引起肠炎、肺炎、心包炎以及局部化脓炎症、脓毒症等疾病 [1]。有些金葡菌可以产生青霉素酶,表现为青霉素耐药。甲氧西林是一种半合成青霉素,耐甲氧西林金葡菌被称为超级细菌,目前针对耐甲氧西林金葡菌的检测,是一项重要的临床课题。

1资料与方法

1.1一般资料。在我院 2016 年 1 月至 2017 年 1 月的临床感染标本中分离出金葡菌菌株 120 株作为研究对象,菌株主要来源于患者的痰液、尿液、脓液、血液、咽拭子、深静脉置管以及坏死组织。

1.2方法。分别采用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法及 PCR 法对 120 株金葡菌菌株进行检测,并以PCR 法的检测结果作为黄金标准,比较不同检测方法对耐甲氧西林金葡菌的检测效果。

1.2.1苯唑西林纸片扩散法:将金葡菌菌株浓度调制 1.5×108 CFU/mL,然后将标本涂抹在 4 mm 的 MH 琼脂平板上,在琼脂板上贴上苯唑西林纸片,放置在 35℃环境下,孵化 24 h。若抑菌圈直径 ≤18 mm 为耐药,≥20 mm 为敏感。

1.2.2头孢西丁纸片扩散法:将金葡菌菌株浓度调制 1.5×108 CFU/mL,然后将标本涂抹在 4 mm 的 MH 琼脂平板上,在琼脂板上贴上头孢西丁纸片,放置在 35℃环境下,孵化 24 h。若抑菌圈直径 ≤10 mm 为耐药,≥13 mm 为敏感。

1.2.3PCR 法:将金葡菌菌株浓度调制 3×108 CFU/mL, 同时在 50 μL DNA 提取液中滴入 10 μL 菌悬液,严格按照说明书进行 PCR 操作。在 100℃温度下水浴 15 min,以20000 r/min 的转速进行离心处理 10 min,再取 5 μL 上清液进行扩增处理。将扩增后的液体取 10 μL 置于 2.0% 琼脂糖 TRB 缓冲系统中进行电泳,利用紫外透射进行检测,若发现 1000 bp 条带则为阳性。

1.3 统计学分析。采用 SPSS 19.0 统计学软件进行分析和统计,计量资料用均数 ± 标准差( ±s)表示,并行 t 检验, 计数资料采用 [n (%)] 表示,并行卡方检验,以 P< 0.05 为差异有统计学意义。

2结果

120 株金葡菌菌株经 PCR 法检测发现耐甲氧西林金葡菌71 株(59.17%),甲氧西林敏感金葡菌 49 株(40.83%)。苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率及 Youden 指数分别为 81.69%、77.56%、18.31%、22.45%、0.584; 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率及Youden 指数分别为 92.96%、95.92%、7.04%、4.08%、0.817; 比较示头孢西丁纸片扩散法对耐甲氧西林金葡菌的检测效果优于苯唑西林纸片扩散法(P< 0.05),详见表 1 和表 2。

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3讨论

金葡菌又称嗜肉菌,而耐甲氧西林金葡菌则是由金葡菌演变而来的新型耐药型金葡菌,是一种超级细菌,具有很强的药物抵抗性。耐甲氧西林金葡菌自身固有耐药性,可与细菌自身生产PBP,其可在 β- 内酰胺类抗生素环境中生存[2]。其次耐甲氧西林金葡菌还具有获得耐药性。研究发现,耐甲氧西林金葡菌还可改变抗生素作用靶向,从而降低膜通透性, 生成修饰酶,以起到抵抗多类药物的效果。

目前,临床检测耐甲氧西林金葡菌的主要方法有:PCR 法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法等。其中
PCR 法的检测结果多作为黄金标准,而纸片扩散法则相对来说操作简单,成本低,检测结果直观 [3-4]。

根据本组研究结果示:120 株金葡菌菌株经 PCR 法检测发现耐甲氧西林金葡菌 71 株(59.17%),甲氧西林敏感金葡菌 49 株(40.83%)。苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率及Youden 指数分别为 81.69%、77.56%、18.31%、22.45%、0.584;头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌的灵敏度、特异度、漏诊率、误诊率及 Youden 指数分别为 92.96%、95.92%、7.04%、4.08%、0.817[5];比较示头孢西丁纸片扩散法对耐甲氧西林 金葡菌的检测效果优于苯唑西林纸片扩散法(P< 0.05)。可以得出结论:PCR 法是检测耐甲氧西林金葡菌的首选方法, 此外头孢西丁纸片扩散法操作方便、实验要求低、结果较准确, 也是一种较好的检测方法。

参考文献:

[1]黎文君. 耐甲氧西林金葡菌检测方法比较 [J]. 现代仪器与医疗,2015,21(01):74-75.
[2]佟爽 , 何平.110 例老年患者耐甲氧西林金葡菌的感染现状及耐药性分析 [J]. 实用药物与临床 ,2015,18(01):79-82.
[3]闫虹 . 耐曱氧西林金黄色葡萄球菌耐药性及其分型研究 [D]. 郑州大学,2015.
[4]刘潇. 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 SCCmec 基因分型检测与耐药性分析[D]. 新疆医科大学,2013.
[5]谌秋华, 范丛进. 耐甲氧西林金葡菌的头孢西丁检测法与耐药性分析[J]. 中国抗生素杂志 ,2005(11):672-673+685.

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